分光光度法和葉綠素計(jì)測定法之比較
分光光度法和葉綠素計(jì)測定法之比較
葉綠素含量的測定，歷來是實(shí)驗(yàn)室的重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)之一，因?yàn)槿~綠素含量的多少，可以直接現(xiàn)實(shí)植物的生長狀況，另外，葉綠素含量的參數(shù)SPAD，也能夠顯示土壤中氮肥的含量，指導(dǎo)土壤的施肥。通過便攜式葉綠素儀對植物葉綠素含量的評估，我們能夠節(jié)約20%的氮肥用量，也在一定程度上保護(hù)了環(huán)境。那么如何測定植物葉片的葉綠素含量呢？下面我們來介紹下分光光度法和葉綠素計(jì)法。
分光光度法：需要的儀器設(shè)備：分光光度計(jì)、電子頂載天平（感量0.01g）、研缽、棕色容量瓶、小漏斗、定量濾紙、吸水紙、擦境紙、滴管；試劑：96％乙醇（或80％丙酮）；石英砂；碳酸鈣粉。具體方法如下：取新鮮植物葉片（或其它綠色組織）或干材料，擦凈組織表面污物，剪碎（去掉中脈），混勻。2. 稱取剪碎的新鮮樣品0.2g，共3份，分別放入研缽中，加少量石英砂和碳酸鈣粉及2～3ml95％乙醇，研成均漿，再加乙醇10ml，繼續(xù)研磨至組織變白。靜置3～5min。3. 取濾紙1張，置漏斗中，用乙醇濕潤，沿玻棒把提取液倒入漏斗中，過濾到25ml棕色容量瓶中，用少量乙醇沖洗研缽、研棒及殘?jiān)鼣?shù)次，最后連同殘?jiān)黄鸬谷肼┒分小?.用滴管吸取乙醇，將濾紙上的葉綠體色素全部洗入容量瓶中。直至濾紙和殘?jiān)袩o綠色為止。最后用乙醇定容至25ml，搖勻。5.把葉綠體色素提取液倒入光徑1cm的比色杯內(nèi)。以95％乙醇為空白，在波長665nm、649nm下測定吸光度。然后根據(jù)相應(yīng)的公式，代入就可計(jì)算得到葉綠素的值。
葉綠素計(jì)法：葉綠素計(jì)測定植物葉片的綠色程度，相當(dāng)方便快捷，而且對葉片不會(huì)造成損害。你只許將葉片夾在儀器中間，然后按下儀器開關(guān)，不出兩秒，就能夠得到葉片的SPAD值，即植物的葉綠素含量。因?yàn)闇y出的結(jié)果是用SPAD值表示，因此該款儀器又叫做SPAD502葉綠素儀，其中SPAD502為型號。SPAD502葉綠素儀大大節(jié)約了測定葉綠素含量的時(shí)間和步驟，為我們了解植物的生長狀況，以及提供施肥方案，帶來了極大的便利。而且用該儀器的精確度，并不比用分光光度法低，因此，在很多農(nóng)業(yè)部門、大專院校，都會(huì)選擇一款適合的葉綠素計(jì)，來測定植物的葉綠素含量，或者作為其他方法測出葉綠素含量值的參照。
